3LM Klinische biotechnologie: lab

Uit Diana's examenwiki

Klinische biotechnologie: lab

12/01/2015

Veel kleine vraagjes: VEEL schrijven met een lang examen zoals altijd (7 pagina's en 1 bijlage)

  1. Berekenen 4 stoffen samen in 400 ml, hoe bereiden? EDTA 7%, Tris-base (pH8)..., Nacl 2% , glycerol (0,02% w/v)
  2. Berekenen 5X stock TBE-buffer, de componenten staan gegeven samen met hun concentratie (in mM) van 1X stock.
  3. Insert introduceren in plasmide (niet pUC en pAMP maar iets anders, de bp zijn gegeven) --> hierop vragen stellen
  4. Miniprep: uitleggen principe van SDS en NaOH
  5. Hoe maak je een 0,7% agarose gel? + leg bereiding uit. De buffer is gegeven maar dan wel in een ...X concentratie.
  6. Concentratie DNA berekenen (A 260 gegeven, verdunningsfactor, opgelost in 100µl)
  7. Hoeveel µl DNA nodig uit vorige vraag voor 1µg DNA en hoeveel loading buffer nodig?
  8. Welke kleurstoffen bevat de loading dye? Leg uit.
  9. Deel restrictie enzymen: Gel gegeven met erop: ladders, restrictictie met 1e enzyme,2e enzyme,3e enzyme, plasmide dna (niet die wij kennen. Schat op laan6 bij BamH1 de 2 fragmenten.
  10. Dubbele restrictie: berekenen zoveel primers nodig, d.H2O, DNA etc
  11. Tm primers berekenen
  12. Schema PCR aanvullen (temp, predenaturatie, ...°C)
  13. Op vorige verder: leg uit de °C bij annealing
  14. Principe wit-blauw screening uitleggen.